朱海荣,段霞瑜,周益林,邱永春.小麦白粉病菌基因组DNA的微量提取及ISSR-PCR反应体系的优化[J].植物保护,2010,36(3):125-129. |
小麦白粉病菌基因组DNA的微量提取及ISSR-PCR反应体系的优化 |
DNA microextraction from wheat powdery mildew and optimization of the reaction system for ISSR-PCR |
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DOI: |
中文关键词: 小麦白粉病菌 DNA微量提取 ISSR PCR 体系优化 |
英文关键词:wheat powdery mildew DNA microextraction ISSR optimization of PCR reaction |
基金项目:国家重点基础研究发展计划课题,"十一五"科技支撑计划课题,公益性行业科研专项,国家自然科学基金? |
朱海荣 段霞瑜 周益林 邱永春 |
1. 沈阳农业大学植物保护学院,沈阳110161;2.中国农业科学院植物保护研究所,植物病虫害生物学国家重点实验室,北京100193 |
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中文摘要: |
为了寻找适合小麦白粉菌基因组DNA微量提取的方法,本试验利用改进的CTAB法、电钻微量研磨一管法、FastPrep DNA 试剂盒法和Chelex 100法分别提取小麦白粉菌基因组DNA。比较得出, 在微量提取时,CTAB法的提取率较高;在分生孢子量较多时,FastPrep DNA 试剂盒方法提取的DNA质量较高,这两种方法提取的DNA均适用于ISSR PCR。采用正交设计L16(45)法优化了适合于小麦白粉病菌群体的ISSR体系, 确定了25 μL时优化的反应体系:1×buffer、模板DNA 0.5 ng、dNTP 0.14 mmol/L、TaqDNA聚合酶1U、引物1.4 μmol/L、Mg2+ 1.8 mmol/L。利用该体系筛选出了一批多态性较好的ISSR引物,为小麦白粉病菌遗传多样性研究奠定了基础。 |
英文摘要: |
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