刘永刚,漆永红,赵丽娟,吕和平,Liu Yonggang,Qi Yonghong,Zhao Lijuan,Lü Heping.桃蚜基因组DNA提取及SSR反应体系优化和应用[J].植物保护,2009,35(4):96-100. |
桃蚜基因组DNA提取及SSR反应体系优化和应用 |
Extraction of genomic DNA from the peach-potato aphid Myzus persicae and optimization of SSR reaction system |
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DOI: |
中文关键词: 桃蚜 基因组DNA 提取方法 SSR 体系优化 |
英文关键词:SSR |
基金项目:农业部农业行业专项基金,甘肃省科技计划项目? |
刘永刚 漆永红 赵丽娟 吕和平 Liu Yonggang Qi Yonghong Zhao Lijuan Lü Heping |
1. 甘肃省农业科学院植物保护研究所,兰州730070;2. 甘肃省农业科学院生物技术研究所,兰州730070 |
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中文摘要: |
针对蚜虫体型微小,体表有外骨骼等特点对改进的醋酸钾(KAC)法作了优化,优化后的方法可在常温条件下更加简易和有效地提取高质量的单头蚜虫基因组DNA,结果表明,DNA样品的A260/280值普遍在1.6~1.9之间,电泳检测基因组DNA纯度和完整性较好。同时在20 μL的反应体系中将PCR的5个主要成分分别设定10个浓度梯度,研究了适合桃蚜SSR分子标记的优化体系,结果表明,最适宜的优化浓度分别为:1.5 mmol/L Mg2+,0.25 mmol/L dNTP,1.0U Taq酶,40 ng/μL模板DNA,25 ng/μL引物。利用甘肃省酒泉地区马铃薯桃蚜来验证此优化体系,30%聚丙烯酰胺凝胶电泳检测结果显示,扩增产物大多在100~300 bp,多态性高,且反应体系的稳定性和可重复性好。 |
英文摘要: |
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