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阚国仕,李雪,王海鸿,丁建云.美国白蛾基因组DNA提取及RAPD反应条件优化[J].植物保护,2009,35(3):84-88.
美国白蛾基因组DNA提取及RAPD反应条件优化
Extraction of genomic DNA and optimization of RAPD system for Hyphantria cunea
  
DOI:
中文关键词:  美国白蛾  正交设计  DNA提取
英文关键词:RAJPD
基金项目:北京市植物保护站专项资金项目?
阚国仕  李雪  王海鸿  丁建云
1. 沈阳农业大学生物科学技术学院,沈阳110161;2. 中国农业科学院植物保护研究所, ;北京100193;3. 北京市植物保护站,北京100029 ;
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中文摘要:
      用改进的SDS法从无水乙醇浸泡美国白蛾幼虫标本中提取到高分子量的可用于RAPD扩增的基因组DNA。用正交试验对影响RAPD扩增的条件进行优化得到最佳反应体系:20 μL反应体系中,模板浓度1.25 ng/μL、引物浓度1.2 ng/μL、dNTP浓度 0.2 mmol/L、Mg2+浓度 3.0 mmol/L、TaqDNA聚合酶用量2.5 U。确定最佳退火温度为38 ℃。PCR反应条件:94 ℃ 30 s、38 ℃ 60 s、72 ℃ 60 s 35个循环后,72 ℃延伸5 min。为在分子水平上讨论美国白蛾种群的遗传分化提供基础。
英文摘要:
      
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